迈迪安推出全新的无甘油热启动Tth DNA 聚合酶（HC）是一款具有逆转录酶活性和DNA聚合酶活性的热稳定双功能酶。

 

Tth DNA聚合酶提取自嗜热菌 Thermus thermophilus（Tth），具有5’- 3’外切酶活性，缺乏3’-5’外切酶和RNase H活性。

 

该酶在大约pH9(+25℃调整)，温度+75℃时活性最高，在高温(95℃)延长反应中依然保持活性。

 

Tth DNA聚合酶具有内在的逆转录酶活性，在Mg²⁺存在的条件下，转录效率高远高于Taq DNA聚合酶的转录效率。它能在高温（55°C至70°C）下进行反转录和DNA扩增，可直接对RNA模板进行扩增，且对RNA病毒等具有高二级结构的模板具有更高的扩增灵敏性。生成的cDNA在Mg²⁺存在的情况下，可通过相同的酶进行PCR扩增。

 

因为Tth DNA聚合酶能够在较高的温度范围进行逆向转录和DNA扩增，因此可用于对细胞和病毒RNA进行定量RT-PCR、克隆和基因表达分析。Tth DNA聚合酶可用于最多1kb RNA RT-PCR扩增。

 

迈迪安的无甘油热启动Tth DNA聚合酶采用抗体介导的热启动技术，进一步提高了检测的特异性和灵敏度，随附的5x反应缓冲液含有核苷酸和冻干所必需的辅料。该体系可用于开发便于POC场景、常温稳定、或需要低粘稠度配方以方便自动化移液的高通量自动化平台。

 

01 产品亮点

• 耐高温：在高温（55°-70°C）条件下可一步扩增RNA

• 灵敏度：对具有复杂二级结构的RNA靶标有更高灵敏度

• 灵活性：高浓度规格提供（200 U/μL），对微流控体系的应用更友好灵活

• 可冻干：不含甘油，是自动化高通量平台或POC检测的理想选择

 

02 性能数据

反应设置：

 

在95°C维持稳定性至少10分钟

 

无甘油热启动Tth DNA聚合酶（MDX205，红色）、MMLV-RT（蓝色）和AMV-RT（黑色）从40°C至95°C预孵育10分钟后，对小鼠RNA进行多重一步法RT-qPCR检测，对比其性能。ΔCt值是根据同一酶在-20°C下产生的Ct值计算得出的。数据显示，MDX205在95°C下10分钟后仍能保持其全部性能，而MMLV-RT和AMV-RT则分别在55°C和60°C以上失去了活性。

 

更优的扩增性能和灵敏度分钟

 

将无甘油热启动Tth DNA聚合酶（MDX205，红色）与 Lyo-Ready™ Tth 反应缓冲液混合后冻干，然后分别对 A) 哺乳动物DNA进行qPCR扩增，或 B)哺乳动物RNA进行RT-qPCR反应，反应性能与HawkZ05快速聚合酶（Roche，绿色）进行对比。结果显示，与对比酶相比，无甘油热启动Tth DNA聚合酶具有更好的性能和灵敏度。

 

 

冻干后可保持长达12个月的稳定保质期

 

无甘油热启动Tth DNA聚合酶（MDX205）与Lyo-Ready™ Tth反应缓冲液混合后冻干（红色），然后在37°C下储存1个月，进行加速热稳定性检测，对 A）哺乳动物DNA；或 B）哺乳动物RNA进行三重扩增，反应性能与储存在-20°C的新鲜液体体系（蓝色）进行对比。结果显示，冻干体系的检测性能和液体一致，预计在室温下稳定性为至少保持12个月。

 

03 产品信息

 

 

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Meridian迈迪安致力于提供最高质量的分子原料酶制剂，全球研发生产基地均通过了 ISO 13485认证。我们始终坚持以客户为中心，以高质量的服务和产品为合作伙伴提供价值。

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