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专门针对尿液样本的可风干直扩qPCR试剂--适用于膀胱癌和前列腺癌的筛查检测

人阅读 发布时间:2021-10-08 12:39

日前,迈迪安生物科技公司(Meridian)推出了市场shou个

专门针对尿液样本直接扩增

可风干尿液直扩qPCR/RT-qPCR预混液

Air-Dryable™ Direct DNA/RNA Urine qPCR Mixes


该试剂有两款,一款专门适用于DNA模板(MDX150),另一款为可同时适用于RNA和DNA (MDX151,含逆转录酶)。 该产品不含甘油,具有抗抑性,是专门为开发从尿液中免核酸提取、进行DNA/RNA 直扩常温稳定型检测设计的一款qPCR试剂。


 

    迈迪安是全球shou个拥有

    专门针对不同类型样本

    抗抑可风干直扩分子检测试剂

    该系列产品能为开发常温稳定并且可免核酸提取直扩的诊断检测提供全面的方案↓↓↓↓

     

    为什么要特定样本类型的直扩试剂?

    不同的临床样本中含有的PCR抑制物不同, 例如,血液中含有血红蛋白和免疫球蛋白G等,植物中的多糖多酚等,唾液中存在黏蛋白和蛋白酶,尿液样本中存在的尿素,粪便样本中存在的胆酸盐等等。 

    一般的抗抑性qPCR试剂可能对某种抑制物耐受性比较好,而对另一种抑制物耐受性一般,因此使用普通的抗抑性试剂很难对每种临床样本的直扩检测都能达到理想的灵敏度。

    而迈迪安推出特定样本类型的直扩qPCR试剂含有独佳优化的缓冲液配方,每一种都对特定样本中的PCR抑制物达到最强的耐受性能,因此直接扩增的灵敏度和特异性都要比使用普通的直扩试剂更好

    迈迪安的可风干特定样本类型的直扩试剂

    是全球市场首创

    不仅如此,该系列试剂含有专门优化的风干赋形剂,即可以用于普通的液体qPCR扩增体系,还可以通过烘箱干燥用于开发常温稳定的干燥型qPCR扩增体系! 

    一个试剂两种用法!

    为开发快速简便的诊断检测提供更多的选择,并且能保证体系性能的灵敏度和可重复性!

    ——————————————————————————————


    尿液是一种理想的临床诊断样本,因为其具有排泄量大、无创性、可自行取样、并且可重复取样等特点。尿液样本目前已被广泛用于诊断和治疗传染病(包括性病)、激素和代谢紊乱、肾脏疾病、膀胱癌、尿路感染(UTIs)以及毒品检测。

    然而,尿液中含有尿素和核酸酶等物质,可以破坏DNA或抑制PCR反应,而且许多疾病标志物仅在低浓度尿液中存在,这些对以尿液为样本的分子检测是个挑战。

    迈迪安推出的Air-Dryable™ 可风干尿液直扩qPCR/RT- qPCR预混液是专门为直接从高浓度尿液中快速灵敏地扩增DNA/RNA设计的抗抑性配方,其高灵敏度甚至可以检测出通常需要验血才能检测到的虫媒病毒,如基孔肯雅病毒。

    在使用时只需要将引物和探针添加到可风干预混液中,再分装到反应容器中(例如:PCR管)进行干燥即可。检测时,只需要将患者尿液样本直接加入干燥后的预混液中,无需核酸提取即可进行检测。

    1. 对尿液样本高效多重扩增

    分别使用风干后的可风干尿液直扩qPCR预混液 (蓝色)、KAPA PROBE FORCE (绿色) and PerfeCTa qPCR ToughMix (灰色)对25%人体尿液样本中的淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和B族链球菌(GBS)靶标进行三重扩增。 结果显示,与对比试剂相比,干燥后的可风干尿液直扩qPCR预混液对25%人体尿液样本具有更高效的多重扩增和灵敏度。  2. 检测尿液样本中的癌症标志物  分别使用风干后的可风干尿液直扩RT-qPCR预混液 (红色)与 UltraPlex 1-Step ToughMix (灰色) 对 10% 人体尿液样本(取自于膀胱癌患者)中的三种癌症标志物mRNA(CDC2 kinase, IGFBP5 and MDK) 进行多重扩增。结果表明,与对比试剂UltraPlex 1-Step ToughMix相比,可风干尿液直扩RT-qPCR预混液能更快速、更灵敏地从尿液样本中检测到癌症相关的RNA标志物。 3. 风干不影响扩增效率和灵敏度

    结果显示,干燥后的试剂和液体试剂保持有相同的高效扩增能力和灵敏度

    将干燥后的可风干尿液直扩RT-qPCR预混液 (红色)与Reliance1-Step Multiplex RT-qPCR Supermix (黑色) 进行性能对比,分别对5%人体尿液样本中1000倍稀释的RNA靶标进行扩增(拷贝数分别为10000和10)。结果显示,干燥后的试剂和液体试剂保持有相同的高效扩增能力,并且灵敏度要比对比试剂Reliance1-Step MultiplexRT-qPCRSupermix更高。

     

    4. 更快速获得检测结果


    分别使用标准扩增循环*和快速扩增循环**进行扩增,结果显示可风干尿液直扩qPCR/RT-qPCR预混液可在最快速反应条件中给出快速优异的扩增结果,并且灵敏度和重现性均不受影响。*qPCR标准循环:95°C 5分钟,95°C 10秒,60°C 30秒,40个循环;快速循环:95°C 3分钟,95°C 1秒, 60 °C 1秒,40个循环。**RT-qPCR标准循环:逆转录10分钟,95°C 10秒,60°C 10秒, 40个循环;快速循环:逆转录5分钟,95°C 1秒,@ 60°C 1秒,40个循环。 5. 风干后预混液保质期可达12个月

    将可风干尿液直扩qPCR/RT-qPCR预混液干燥后进行加速热稳定性实验。试剂干燥后(红色)在 37C 保存1个月,与新鲜液体试剂(黑色)对比,样本为30%人体尿液。结果表明,经过加速稳定性测试,风干混合物在环境温度下保持了充分的活性,预计稳定性大于12个月

    点击此处下载产品彩页:

    迈迪安公司除了有可风干的分子试剂外,也有性能卓越、广受市场和客户好评的可冻干PCR/RT-qPCR试剂以及各种聚合酶Bst酶逆转录酶,能满足不同客户在开发常温稳定干燥型分子检测过程中的不同需求。


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    邮箱:info.cn@meridianlifescience.com

     




    美国迈迪安生物科技是一家大规模生产各种抗体,各种病毒抗原,各种重组蛋白质,各类 PCR 多聚酶,各种核苷酸和体外诊断关键试剂的大型领军企业。40 年以来,迈迪安生命科学公司始终坚持以提供创新的生命科学解决方案和建立值得信赖的合作伙伴关系为我们的宗旨。我们的重点是为体外诊断试剂公司提供优质的原料和服务,使其有助于推动这些领域的发展。

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