可冻干 LAMP /RT-LAMP 预混液：专为 POCT 平台设计的常温稳定干燥型 LAMP 的理想解决方案

POCT 即时检测 (Point-of-Care Testing) ，是在采样现场进行的、利用便携式分析仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式。 近年来，POCT 在诊断市场上迅速获得青睐，尤其是在传染性疾病诊断上。2020 年初的新冠疫情，因其大规模基层检测需求，更是加速了传染类疾病 POCT 的快速发展，其中分子 POCT 崭露头角，迅速登上诊断舞台。

2020 年 7 月，国家国务院常务会议上，李克强总理更是第三次点名加快分子 POCT 研发，再次强调了要加强核酸检测能力建设，加快时间短、灵敏度高、操作简便的产品研发上市，鼓励尽快研发出无需实验室环境、检测时间更短、手段更便捷、准确率更高、更安全的核酸检测迭代技术。



qPCR 目前是分子检测的黄金标准，但是该技术受流程繁琐、操作复杂、需集中送检等限制，耗时相对较长，无法实现 4 小时内出具报告。且需要在特定的 PCR 实验室中进行操作，操作人员也需持有 PCR 上岗证，目前部分医疗机构并不具备核酸检测能力，县级医院建设 PCR 实验室也存在诸多困难和限制。

等温聚合酶链反应，如环介导等温扩增 (LAMP) 已经成为一种适用于分子 POCT 平台的理想方法。分子诊断 POCT 技术集成了分子诊断技术和 POCT 技术，它与传统的 qPCR 都具有快速、高灵敏度和特异性等共同优势，同时又突破了现有检测技术对人员/场所的限制，有效缩短了检测用时，提升了便捷程度。面对突发重大疫情，POCT 核酸检测可应用于更多场景，实现患者的现场及时检测。

近十几年来，环介导等温扩增 (LAMP) 技术在 POCT 诊断中发挥了越来越重要的作用。LAMP 技术主要特点是用到 4-6 个特异性引物，利用链置换型 DNA 聚合酶（例如 Bst 酶）在恒温条件下进行扩增反应，可在 15-60 分钟内获得大量的扩增产物，是灵敏度和特异性都很高的扩增方法。

与常规 PCR/qPCR 技术相比，LAMP 具有许多独特的优点：
（1）LAMP 技术可以在等温条件下实现扩增，不需要进行模板的预变性，减少了 PCR 技术升降温带来的影响以及对昂贵、精密实验仪器的要求，同时扩增效率高，可以在 1 h 内把几拷贝的目的序列迅速扩增到 10 拷贝；
（2)  LAMP 技术分别使用一对外部引物和一对内部引物，可以识别目的序列上 6 个不同的区域，对目的序列具有高度的选择性，减少了非靶标序列的影响，因此扩增的特异性非常高；
（3）阳性扩增反应中会产生大量的类似花椰菜结构的产物和白色焦磷酸续沉淀，扩增产物的检测方法多样，可用凝胶电泳检测、直接用肉眼检测或在反应体系中加人染料，根据颜色的变化进行检测，还可以利用浊度仪，根据扩增产物混浊度的不同对原始核酸分子进行实时定量分析。





（4）对常见的 PCR 抑制物耐受性更强，因此，对于某些病原体可直接利用简单处理的样本作为模板，省略繁琐的 DNA/RNA 提取步骤。

LAMP 与 PCR 检测对比总结如下：


综上所述， LAMP 技术因其快速、高效、特异、灵敏和经济等优点，已经应用于病原菌、寄生虫、病毒、疾病和转基因产品检测等领域，并且还将广泛应用于临床诊断、环境监测、食源安全等领域，是 POCT 检测的理想选择。

迈迪安生物科技目前已经提供一系列性能优越的 Bst 聚合酶（包括无甘油可冻干的 Bst 酶）和免提取直扩的缓冲液。
 

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POCT 分子检测在新冠疫情以来已经凸显了优势，由于检测反应可在单一温度下进行，无需传统 PCR 的热循环扩增仪，因此大大降低了成本和操作的复杂性。为了进一步推行 POCT 的发展应用，对开发常温稳定的干燥型 LAMP 检测需求也越来越高， 因为这可以减少冷链存储环节的成本和潜在问题。  

迈迪安公司新推出的可冻干 LAMP（MDX097）/RT-LAMP (MDX108) 预混液就是为了满足这一需求。其中，可冻干 RT-LAMP 一步法预混液更是特有的单管设计，包含了 RT-LAMP 反应需要的逆转录酶、Bst 酶，优化的缓冲液，以及可兼容冻干的辅料。  与 RT-qPCR 相比，它具有同样的诊断灵敏度，除此之外的优势还包括更快速、恒温扩增、操作简单以及使用更便宜简便的操作设备。该技术极大地推进了伴随诊断市场，从而实现在医院、农村医疗所甚至机场等非标准检验机构也能够进行快速的分子检测。RT-LAMP 被广泛用于筛选多种病原体，特别是 RNA 病毒，如流感病毒、轮状病毒、丙型肝炎病毒、西尼罗河热、登革病毒、埃博拉病毒，以及近年的 SARS-CoV-2 中。

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关于迈迪安生物科技


Meridian 迈迪安生物科技是一家生物诊断试剂上游原料企业。专业研发生产各种优质的抗原抗体、免疫阻断剂、PCR 聚合酶和优化的预混液、核苷酸等免疫和分子诊断试剂关键原料，为人体、动物、农业、环境及食品安全等各种检测提供全面的解决方案。44 年来，迈迪安已经成为全球各领域诊断企业的主要原料供应商！迈迪安始终坚持以提供创新的生命科学解决方案和建立值得信赖的合作伙伴关系为我们的宗旨。为体外诊断试剂公司提供优质的原料和服务，使其有助于推动这些领域的发展。